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    电竞比赛app下载>技术文章>Sigma蛋白酶K是怎样应用在分子生物学中的

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    Sigma蛋白酶K是怎样应用在分子生物学中的

    DIANJICISHU:56 FABUSHIJIAN:2021-08-25

       Sigma蛋白酶K是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌中纯化得到。蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定,还具有降解天然蛋白质的能力。
     
      Sigma蛋白酶K是怎样应用在分子生物学中的
      线粒体分离
      核酸纯化产物的蛋白质消解。在分子生物学应用中,蛋白酶K常用于消解无用的蛋白质,例如从微生物、培养细胞和植物的DNA或RNA制剂中消解核酸酶。在核酸制剂之中,这种酶的使用浓度通常为50-200µg/ml,pH7.5-8.0,37°C。孵育时间30分钟至18小时不等。尽管在长期孵育时,蛋白酶K可以自动消解,但通常还是通过后续的本分萃取法使其变性。
      蛋白酶K已经用于去除阳离子蛋白质上结合的内毒素,如溶菌酶和核糖核酸酶A上的内毒素。
     
      确定酶在膜上的分布
      处理石蜡包埋的组织,以便暴露抗原结合位点进行抗体标记。
     
      去除核酸酶进行原位杂交
      传染性海绵状脑病(TSE)朊病毒研究及草拟的诊断测试方法利用蛋白酶K消解来自大脑组织样本的蛋白质。
      采用蛋白酶K消解法进行蛋白酶足迹实验,去除蛋白质-蛋白质表面互作。

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